預凍時一般冷凍速度控制在以每分鐘下降1 ℃為好、使樣品凍結到-35 ℃。液氮罐廠家小編了解到目前常用的有三種控溫方法：

(1)程序控溫降溫法，應用電子計算機程序控制降溫裝置，可以穩(wěn)定連續(xù)降溫，能很好地控制降溫速率。

(2)分段降溫法：將菌體在不同溫級的冰箱或液氮罐口分段降溫冷卻，或懸掛于冰的氣霧中逐漸降溫。一般采用二步控溫，將安瓿管或塑料小管，先放-20 ℃至-40 ℃冰箱中(1～2) h，然后取出放入液氮罐中快速冷凍。這樣冷凍速率大約每分鐘下降(1～1.5) ℃。

(3)對耐低溫的微生物、可以直接放入氣相或液相氮中。